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紫外可見分光光度計(jì)原理和操作步驟

瀏覽量:375 發(fā)布時(shí)間:2020-12-11 09:54:03

 

紫外可見分光光度計(jì)原理是:

  分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后,發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。它是帶狀光譜,反映了分子中某些基團(tuán)的信息??梢杂脴?biāo)準(zhǔn)光譜圖再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析。

紫外可見分光光度計(jì)原理和操作步驟.png

  根據(jù)Lambert-Beer定律:A=εbc,(A為吸光度,ε為摩爾吸光系數(shù)b為液池厚度,c為溶液濃度)可以對(duì)溶液進(jìn)行定量分析。

  基本操作:

  (1)通電---儀器自檢----預(yù)熱20min;

  (2)用鍵設(shè)置測(cè)試方式:透射比(T),吸光度(A),已知標(biāo)樣濃度方式(C)和已知標(biāo)樣濃度斜率(K)方式;

  (3)波長選擇:用波長調(diào)節(jié)旋鈕設(shè)置所需的單色光波長;

  (4)放樣順序:打開樣品室蓋,在1~4號(hào)放置比色皿槽中,依次放入%T校具(黑體),參比液,樣品液1和樣品液2.

  (5)校具(黑體)校"0.000":將%T校具(黑體)置入光路,在T方式下按"%T"鍵,此時(shí)儀器自動(dòng)校正后顯示"0.000"

  (6)參比液校"100"%T或"0.000"A:將參比液拉入光路中,按"0A/100%T"鍵調(diào)0A/100%T,此時(shí)儀器顯示"BLA",表示儀器正在自動(dòng)校正,校正完畢后顯示"100"%T或"0.000"A后,表示校正完畢,可以進(jìn)行樣品測(cè)定.

  (7)樣品測(cè)定:將兩樣品液分別拉入光路中,此時(shí)若在"T"方式下則可依次顯示樣品的透射比(透光度)若在"A"方式下,則顯示測(cè)得的樣品吸光度.


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